Реакция конглютинации с желатиной обычно проводится в пробирках емкостью 8ЂЂЂ10 мл. В штатив устанавливают 2 ряда пробирок для двух различных серий стандартной сыворотки. В контрольные пробирки каждого ряда вводят по 1 капле стандартных резус-положительных и резус-отрицательных эритроцитов, в остальные пары пробирок ЂЂЂ исследуемые эритроциты. Исследование можно проводить как с отмытыми, так и с неотмытыми эритроцитами. Затем в каждую пробирку добавляют по одной капле подогретой до разжижения желатины (10% раствор) и по одной капле стандартной сыворотки. Содержимое пробирок смешивают путем встряхивания и помещают в водяную баню при t` 46ЂЂЂ48` на 5 мин., по истечении которых в каждую пробирку доливают 5ЂЂЂ8 мл подогретого до t` 46ЂЂЂ48` физиологического раствора NaCl и рассматривают на свет, определяя наличие или отсутствие агглютинацииPP (рис.PP 2).
Рис. 2. Результаты реакции определения резус-фактора с применением желатины: 1 ЂЂЂ наличие агглютинации; 2 ЂЂЂ отсутствие агглютинации.
Для постановки реакции конглютинации в сывороточной среде, кроме исследуемых эритроцитов, необходимо иметь две серии стандартных сывороток антирезус и контрольные образцы резус-положительных и резус-отрицательных эритроцитов. Реакция проводится на чашках Петри, куда наносятся в шесть точек по 2 капли стандартной двух различных серий (3 точки одной и 3 точки другой серии). Затем в первые точки различных серий стандартной сыворотки добавляется по 1 капле 5ЂЂЂ10% взвеси контрольных резус-положительных эритроцитов, во вторые точки ЂЂЂ по 1 капле 5ЂЂЂ10% взвеси контрольных резус-отрицательных эритроцитов, в третьи точки ЂЂЂ такое же количество исследуемых эритроцитов. После смешивания (стеклянными палочками) сывороток в каждой точке с добавленными эритроцитами чашку помещают в водяную баню при t` 46ЂЂЂ48` на 7ЂЂЂ10 мин. О результатах судят по наличию или отсутствию агглютинации в каплях с исследуемыми эритроцитами(рис. 1),рассматривая их над источником света.
Рис. 1. Определение резус-фактора в . Исследуемые резус-положительные.
Методика определения резус-фактора в эритроцитах различна и зависит от формы антител, содержащихся в стандартной сыворотке. При неполных антителах наиболее часто применяется реакция агглютинации (конглютинации) в различных коллоидных средах (нативной сыворотке, желатине), реакция с протеолитическими и др.
Резус-фактор находится в эритроцитах 85% людей, кровь которых называется резус-положительной (Rh+)- Около 15% людей не обладает резус-фактором, и кровь их называется резус-отрицательной (RhЂЂЂ). Существует несколько различных антигенов (см.) системы резус, которые могут находиться в эритроцитах людей вместе или порознь. Нормальные естественные антитела к антигенам системы резус, как правило, не встречаются. Однако в результате иммунизации человека резус-фактором во время беременности или при многократных переливаниях резус-положительной крови резус-отрицательному реципиенту могут, образоваться иммунные антитела антирезус неполной или полной формы. При трансфузии (см. ) резусположительной крови резус-отрицательному реципиенту, содержащему резус-антитела, наступает гемолиз (см.) эритроцитов донора, что влечет за собой трансфузионную реакцию или осложнение. Для профилактики подобных осложнений необходимо переливать резус-отрицательному реципиенту только резус-отрицательную кровь и перед переливанием производить пробу на совместимость не только по группам крови, но и по резус-фактору.
Резус-фактор ЂЂЂ врожденное групповое свойство эритроцитов человека, обусловленное присутствием в них антигенов резус. Резус-фактор не зависит от признаков других групповых систем, передается по наследству и не меняется в течение всей жизни; обозначается символом Rh.
Резус-фактор положительный отрицательный определение конфликт при беременности
Комментариев нет:
Отправить комментарий